1、提取DNA外切酶,放入试管中,适宜温度,PH,加入核酸外切酶,一段时间后,电泳,观察是否出现长短不同外切酶的带,若有,则有活性,若无,则无活性;核酸外切酶exonucleautomotive service engineers在核酸水解酶中,是具有从分子链外切酶的末端顺次水解磷酸二酯键而生成单核苷酸作用的酶;可以在dna或rna分子内部切断磷酸二酯键,称内切酶仅能水解位于核酸分子链末端的核苷酸叫外切酶;外切酶即核酸外切酶exonuclease 核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解35磷酸二酯键,降解核苷酸的酶其水解的最终产物是单个的核苷酸DNA为dNMP,RNA为NMP按作用的特性差异可以将其分为单链;核酸外切酶 有些核酸酶能从DNA或RNA链的一端逐个水解下单核苷酸,所以称为核酸外切酶只作用于DNA的核酸外切酶称为脱氧核糖核酸外切酶,只作用于RNA的核酸外切酶称为核糖核酸外切酶也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA核酸;DNA酶就是核酸酶可分为两类核酸外切酶是从核酸的一端开始,一个接一个把核苷酸水解下来核酸内切酶则从核酸链中间水解 3’,5’磷酸二酯键,将核酸链切断很多细菌和细胞中都能识别外来的核酸并将 其分解;可以被枯草杆菌蛋白酶水解成Klenow片段和N端具5#393#39外切酶活性的分子图23 DNA聚合酶I二 Klenow酶该酶无5#393#39外切活性,保留外切酶了5#393#39聚合活性及3#395#39外切活性,基因工程中利用该酶修复限制性内切酶造成的5#39突出的粘性末端;一般的taq酶没有5‘3’的外切活性,不过现在有一些酶,比如TAKARA的ExTaq是有5‘3’的外切活性的,主要是为外切酶了减少错配提高保真率再好的就是PrimerStar了另外还有pfu酶,最近用的比较多,保真性介于Ex和PS之间。
2、核酸外切酶是从双链核酸中的一条链的切口处,从5#39端或者3#39端逐个切下单核苷酸,即切断核酸的3#39,5#39-磷酸二酯键,产生单核苷酸注核酸就是右单核苷酸通过3#39,5#39-磷酸二酯键连接而成。
3、两者同属核酸酶,只是切割核酸的方式不一样而已凡能从多核苷酸链的末端开始水解核酸的酶称为核酸外切酶,凡能从多核苷酸链中间开始水解核酸的酶称为核酸内切酶而能识别特定的核苷酸顺序,并从特定位点水解核酸的内切酶称为;DNA聚合酶具有两种活性,一个是聚合酶活性,5’3’,意思是说在合成的单链或者引物链的3’加上与模板链互补的脱氧核苷酸 此外,DNA聚合酶还有一个外切酶活性位点,用来校正剪切掉错误的脱氧核苷酸这个活性是3’5;首先,明确几个概念在分子生物学中,内切酶和外切酶指的是核酸酶内切酶通过打断核酸链内部的磷酸二酯键,从中间将其切开外切酶则只能打断核酸链3‘端或5’端的磷酸二酯键,将核苷酸一个一个的水解下来而脱支酶;1水解位置不同 核酸内切酶是一类能从DNA分子中间水解磷酸二酯键,从而切断双链DNA的核酸水解酶核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解35磷酸二酯键,降解核苷酸的酶2切点要求不同 核酸内切酶的。
4、肽链外切酶是从肽链的一端开始,一个接一个把氨基酸水解下来 作用位点 端点 核酸内切酶则从肽链中间特殊的肽链位点将多肽裂解成小片断 作用位点 中间特殊的肽链位点;核酸外切酶核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解35磷酸二酯键,降解核苷酸的酶其水解的最终产物是单个的核苷酸DNA为dNTP,RNA为NTP按作用的特性差异可以将其分为单链的核酸外切酶和双链的核酸。
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